
1.溫度
溫度對微生物的影響很大,因?yàn)槲⑸锏纳L發(fā)育是一個(gè)極其復(fù)雜的生物化學(xué)反應(yīng),這種反應(yīng)需要在一定的溫度范圍內(nèi)進(jìn)行,所以溫度對微生物的整個(gè)生命過程都有著極其重要的影響。
從微生物的總體來看,生長溫度范圍很廣,可在0~80℃,各種微生物按其生長速度可分為三個(gè)溫度界限,即最低生長溫度、最適生長溫度、最高生長溫度。超過最低和最高生長溫度的范圍,生命活動(dòng)就要中斷。因此,我們在生產(chǎn)中,可以通過對溫度的控制來促進(jìn)有益微生物的生長,抑制或消滅有害微生物的發(fā)育。
那么,什么是最低生長溫度呢?它是指微生物生長與繁殖的最低溫度,在這個(gè)溫度時(shí),微生物生長最慢,低于這個(gè)溫度,微生物就不能生長。最適生長溫度是指微生物生長最適宜的溫度,在這個(gè)溫度時(shí),如果其他條件適當(dāng),則微生物生長最快。而最高生長溫度就是在其他環(huán)境因素保持不變前提下,微生物能夠生長繁殖的最高溫度。高于這個(gè)溫度,微生物的生命活動(dòng)就要停止,甚至死亡。
在物理因素中,溫度對微生物的影響最為重要。微生物在生長繁殖過程中吸熱反應(yīng)和放熱反應(yīng)是共同進(jìn)行的。在發(fā)酵前期要給予適當(dāng)溫度,以后要適當(dāng)控制溫度,防止升溫過猛!暗蜏厝私选⒕徛l(fā)酵”的精神實(shí)質(zhì)就在于此。
微生物的生長繁殖,不但受到外界溫度的影響,更重要的是外界溫度與菌體內(nèi)部保持熱平衡。也就是說,外界環(huán)境的溫度影響到微生物的生長繁殖,反過來,微生物在大量的生長繁殖過程中也影響外界環(huán)境溫度的改變。如酒精廠在固體制造麩曲過程中的中期和后期,由于微生物的代謝作用,品溫逐漸上升,向著微生物生長繁殖的不利方向發(fā)展。為了控制微生物生長的最適溫度,保證曲子質(zhì)量,根據(jù)品溫上升情況,采取通風(fēng)方法來降低品溫.國內(nèi)酒精廠生產(chǎn)麩曲時(shí),品溫要求保持在37℃左右。初期菌體剛剛開始生長,發(fā)熱量不大,這時(shí)采用間歇通風(fēng)方式,到后期,菌體生長旺盛;伴隨產(chǎn)生大量的熱,因此采用連續(xù)通風(fēng)來降低品溫。
高溫對微生物影響較大,微生物在超過最高生長溫度以上的環(huán)境中生活,就會(huì)引起死亡,溫度越高,死亡越快。但是,微生物對高溫的抵抗力依菌的種類、發(fā)育時(shí)間、有無芽孢而異。例如,無芽孢的細(xì)菌在液體中,55~60C經(jīng)30min即可死亡;70℃時(shí)僅10~15min死亡;100℃僅幾分鐘就可死亡。酵母營養(yǎng)細(xì)胞及霉菌菌絲體,在50~60℃時(shí)lOmin左右即可殺死;而它們的孢子在同樣時(shí)間內(nèi)卻要70~80℃才能殺死。芽孢桿菌中的芽孢對熱的抵抗力很強(qiáng),如枯草桿菌芽孢在沸水中煮沸1h也不死,這是因?yàn)檠挎邇?nèi)所含水分較少,菌體蛋白不易凝固。
微生物在高溫下死亡的原因,是由于菌體中的酶遇熱后失去活性,使代謝發(fā)生障礙而引起菌體死亡。
2.氫離子濃度(pH)
氫離子濃度對微生物生命活動(dòng)的影響,是由于氫離子濃度影響細(xì)胞原生質(zhì)膜的電荷,原生質(zhì)膜具有膠體性質(zhì),在一定pH內(nèi),原生質(zhì)帶正電荷,而在另一種pH內(nèi),則帶負(fù)電荷,這種正負(fù)電荷的改變,同時(shí)又會(huì)引起原生質(zhì)膜對個(gè)別離子滲透性的變化,從而影響微生物對營養(yǎng)物質(zhì)的吸收。例如,黑曲霉在pH2~3時(shí),生成檸檬酸,pH近中性時(shí)卻生成草酸;酵母在pH為5左右時(shí),其產(chǎn)物是乙醇,而pH8時(shí)則產(chǎn)生甘油。
各種不同的微生物要求的pH不同,大多數(shù)細(xì)菌,最適pH接近中性或微堿性;酵母和霉菌的最適pH趨向酸性。
在釀酒工業(yè)中,廣泛利用pH抑制雜菌的生長。酒精廠循環(huán)酒母添加硫酸;白酒廠入窖酒醅有一定的酸度,就是利用pH的適宜范圍來抑制不適宜該范圍的雜菌!
各廠一般利用酸度(lg曲或糟消耗0.Imol/L NaOH液的毫升數(shù))來指導(dǎo)生產(chǎn),已經(jīng)取得了很成熟的經(jīng)驗(yàn)。
3.空氣
大多數(shù)微生物在生命活動(dòng)過程中都需要空氣,按照各種微生物對氧的要求不同,可將它們分成如下三類。
(1)好氣性微生物也稱為好氧性微生物,這類微生物在生活中需要氧,只有在氧分子存在的條件下,它們才能正常生活。大多數(shù)微生物都屬于這一類型,如根霉、曲霉等。在制造壓榨酵母時(shí)通風(fēng)可以增加酵母的產(chǎn)量。微生物深層培養(yǎng)時(shí),通入空氣不但影響微生物的生長,還影響微生物的代謝產(chǎn)物,如在抗生素、液體曲、有機(jī)酸的生產(chǎn)過程中通風(fēng)量對產(chǎn)品的產(chǎn)量有很大的影響。
(2)厭氧微生物也稱專性嫌氣微生物。這類微生物不需要分子態(tài)氧,分子態(tài)氧對它們有毒害作用。如丙酮一丁醇菌及其他梭狀芽孢桿菌(如窖泥中能產(chǎn)生己酸的細(xì)菌),只能在無氧或缺少氧的狀態(tài)下生活。
(3)兼性嫌氣性微生物有相當(dāng)多的微生物既能在有氧條件下生長,又能在無氧條件下生活。如酵母在有氧條件下迅速生長繁殖,產(chǎn)生大量菌體,在無氧條件下,則進(jìn)行發(fā)酵,產(chǎn)生大量的酒精。
在實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)好氣性或兼性嫌氣性微生物,若用固體培養(yǎng)基,則通過棉塞的少量空氣即可滿足;若用液體培養(yǎng)基,就需在搖床上培養(yǎng)。而對厭氧性微生物的培養(yǎng),可以用抽真空、焦性沒食子酸吸收、覆蓋無菌石蠟等方法。
4.界面
界面與微生物生長有很大關(guān)系,特別是對固態(tài)法白酒生產(chǎn)來說,界面尤為重要。 我們知道自然界里棲息著大量的微生物,它們生活在不同的狀態(tài)之中。有的在氣相中生長,有的在均一的液相中生長,有的卻生長在各式各樣的固相上。但是為數(shù)極多的微生物卻居住在兩個(gè)不同的接觸面上,這種接觸面稱作界面。居住在界面的微生物群,其生長與代謝產(chǎn)物都與居住在均一相內(nèi)的有明顯不同,這就是界面對微生物的影響關(guān)系。
在不同培養(yǎng)基中(例如米曲汁、米曲汁加乙酸、米曲汁加乳酸)。添加經(jīng)酸堿處理過的玻璃絲作界面,分別培養(yǎng)三種酵母(南陽、漢遜、1312)發(fā)酵試驗(yàn),不論米曲汁或添加乙酸、乳酸的培養(yǎng)基中,乙酸乙酯的生成量都大幅度增加。證明了液體中有固體界面物質(zhì)時(shí)酵母的代謝有明顯的影響。
遼寧金縣酒廠實(shí)驗(yàn)證明,固態(tài)法白酒與液態(tài)法白酒質(zhì)量不同的關(guān)鍵在于前體物質(zhì)、蒸餾操作,特別是由顆粒組成的復(fù)雜的界面,是使兩者不同的重要原因之一。例如,以糖蜜原料液態(tài)發(fā)酵的酒,完全是液態(tài)酒的風(fēng)味,而同樣原料,添加稻殼固體發(fā)酵,就會(huì)有固態(tài)法白酒的風(fēng)味。所以說,白酒固態(tài)發(fā)酵,界面極為復(fù)雜。原料、酒醅、填料對發(fā)酵微生物的吸著狀態(tài)及其對酶活力與代謝的影響;原料粉碎細(xì)度,即顆粒大小對發(fā)酵微生物的影響;加水量的多少,改變了固一液的比例關(guān)系對發(fā)酵微生物的影響。濃香型酒生產(chǎn)中,鼓槌狀菌為什么接種于酒醅中的效果遠(yuǎn)不及接種于泥土中效果顯著,及黏土界面與梭狀菌的關(guān)系等,都是研究白酒發(fā)酵中,界面關(guān)系的重要課題。
以上介紹的與微生物有關(guān)的物理、化學(xué)因素對微生物生長繁殖的影響,是相互交織在一起的,以致構(gòu)成復(fù)雜的發(fā)酵過程。
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